结核分枝杆菌肝素结合血凝素蛋白的表达、纯化及免疫学特性的初步研究

摘要：

目的:克隆肝素结合血凝素(HBHA)基因,并在大肠杆菌中进行表达和纯化,利用获得的蛋白进行免疫学特性的初步研究.方法:用PCR方法从结核分枝杆菌H37Rv基因组扩增出HBHA基因片段,克隆至pMDI8-T载体中,序列测定正确后,将其亚克隆到表达载体pQE80L并在大肠杆菌DH5α中表达,表达蛋白经SDS-PAG及Western-blot分析后,亲和层析法纯化蛋白.获得的蛋白免疫BALB/c小鼠,测定血清抗体水平及IgG2a/IgG1比例.结果:克隆了HBHA基因,并成功表达该蛋白,SDS-PAGE及Western-blot分析表明表达产物正确.通过亲和层析法得到28kD纯化蛋白,与文献报道相符,诱导小鼠可使CD4+和CD8+细胞数明显增加.结论:成功获得了纯化的HBHA蛋白,明确了HBHA蛋白的免疫学特性,为进一步研究HBHA蛋白的致病机理及新型疫苗的开发提供了实验依据.

关键词：结核分枝杆菌、HBHA、表达、纯化

所属期刊栏目：23

分类号：R378.911(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：国家自然科学基金30972767

在线出版日期：2012-03-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：4601-4604