结核分枝杆菌分泌蛋白ESAT-6的表达、纯化和鉴定

摘要：

目的:克隆结核分枝杆菌分泌蛋白ESAT-6基因,并在大肠杆菌中进行表达和纯化.方法:用PCR方法从结核分枝杆菌H37Rv基因组扩增出ESAT-6基因片段,克隆至pMD18-T载体中,序列测定正确后,将其亚克隆到表达载体pGEX-4T-1并在大肠杆菌DH5α中表达,表达蛋白经SDS-PAGE及Western-blot分析后,亲和层析法纯化蛋白.结果:成功克隆了ESAT-6基因,并对其在E.coli中进行了表达,SDS-PAGE及Western-blot分析表明表达产物正确.通过GST纯化系统获得34kD纯化蛋白,与文献报道相符.结论:成功获得了纯化的ESAT-6蛋白,为进一步研究ESAT-6蛋白的致病机理提供了实验依据.

关键词：结核分枝杆菌、ESAT-6、表达、纯化

所属期刊栏目：23

分类号：R378.911(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：国家"863"专项课题2007AA02Z473;国家自然科学基金30972767

在线出版日期：2012-03-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：4409-4411