抗肿瘤疫苗MAGE1-MAGE3-HSP70蛋白特性及其纯化策略的研究
目的:对MAGE1-MAGE3-HSP70(M1-M3-HSP70)融合蛋白的理化性质及其纯化策略进行初步研究,为后期的临床前试验提供数据和依据.方法:以本实验室构建的菌种(BL21(DE3)pLysS - M1-M3-HSP70)为材料,采用常规细菌培养及诱导方法进行诱导表达,用聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)电泳、免疫印迹(Western blotting)对目的蛋白进行分析,然后确定盐析条件,使用Butyl Sepharose HP疏水相互作用层析以及阴离子交换(Source 30Q填料)对目的蛋白的纯化进行分析.结果:M1-M3-HSP70蛋白在大肠杆菌中表达后,目的蛋白分为两部分,一部分为包涵体形式(44.9％),一部分为可溶表达(55.1％).对其可溶部分进行研究发现,细菌裂解后,目的蛋白存在聚合和降解现象；确定了盐析条件、洗脱缓冲液以及稳定的PH值范围,基本确定了目的蛋白的纯化工艺.结论:明确了M1-M3-HSP70融合蛋白的基本性质,确定了目的蛋白的纯化方法,为基于融合蛋白的肿瘤疫苗的进一步研究提供了参考.
融合蛋白、聚合、降解、稳定
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R730.51(肿瘤学)
国家高技术研究发展计划项目"863"计划2007AA02Z470;国家自然科学基金30901735;西安市攻关计划项目SF1028
2012-03-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
4401-4404
