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尿样在SELDI技术中的优化研究

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目的:建立表面增强激光解吸离子化飞行时间质谱(SELDI-TOF/MS)技术检测尿液样本的方法.方法:采用SELDI技术及弱阳离子交换表面蛋白芯片(CM10)对糖尿病病例组和正常对照组的尿液样本进行分析,从尿液标本的采集、样品保存、上样浓度的控制、实验仪器的内外校准、实验结果重复性验证与分析等方面进行实验条件的优化.结果:反复冻融3次以上的样品经SELDI检测的出峰数量和峰强度情况较差;以1∶1或1∶2的浓度作倍比稀释后的样本经芯片检测得到的蛋白峰强度和蛋白数量最优;对两组样本重复检测3次,蛋白丰度的平均变异系数(CV值)分别为0.121和0.095;两组样本共检测到202个蛋白峰,其中差异表达蛋白29个,在肝纤维化组中表达上调13个,表达下调16个.结论:初步建立了SELDI技术检测尿液样本的方法,提高了SELDI技术检测尿液样本的质量.

SELDI-TOF-MS、CM10蛋白芯片、肝纤维化组织

11

R446(诊断学)

2012-01-18(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)

4333-4335

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