重组人小分子抗体ScFv-Fc发酵条件的优化及纯化
目的:研究重组人小分子抗体ScFv-Fc在毕赤酵母中分泌表达的最佳条件,以及ScFv-Fc的纯化方法.方法:分别从甲醇浓度、pH、诱导时间等方面对毕赤酵母重组菌株产生ScFv-Fc的发酵过程进行了优化;通过硫酸铵沉淀结合protein A亲和层析柱,对ScFv-Fc的纯化方法进行了研究.结果:确定ScFv-Fc在毕赤酵母中分泌表达的最佳条件为:在pH5.2的条件下,以0.5%甲醇诱导72 h.经过protein A亲和层析柱纯化后,ScFv-Fc纯度可达94%以上.结论:确定了ScFv-Fc在毕赤酵母中分泌表达的最佳条件以及纯化方法,为重组抗体分子诊断、治疗试剂的开发以及抗体的人源化奠定了物质基础.
ScFv-Fc、表达、毕赤酵母、发酵优化、纯化
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Q75;Q78(分子遗传学)
国家自然科学基金青年基金81000923;吉林大学科学前沿与交叉学科创新创新项目200903339
2011-12-30(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
3048-3051