小鼠Prx2正义和反义真核表达载体的构建与表达
目的:构建小鼠Prx2正义及反义真核表达载体pEGFP-N1-sPrx2、pEGFP-N1-aPrx2并在小鼠卵巢颗粒细胞中表达.方法:应用RT-PCR技术,从小鼠卵巢颗粒细胞提取的总RNA中,获得Prx2基因编码序列的正义及反义片段,克隆至真核表达载体pEGFP-N1中,对重组质粒进行酶切和测序鉴定后,以脂质体介导法转染至体外培养的未成熟小鼠颗粒细胞,通过荧光显微镜观察和Western blot检测其在颗粒细胞中的表达改变.结果:酶切和测序证明重组真核表达载体pEGFP-N1-sPrx2、pEGFP-N1-aPrx2构建成功,荧光显微镜观察及Western blot确认目标蛋白在颗粒细胞中表达增强或减弱.结论:成功构建小鼠Prx2基因正义及反义真核表达载体pEGFP-N1-sPrx2、pEGFP-N1-aPrx2并在小鼠卵巢颗粒细胞中表达.
Prx2、正义/反义、真核表达载体、颗粒细胞、小鼠
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Q95;Q75;Q78(动物学)
卫生部公益性行业科研专项项目200802159;教育部高等学校博士点科研基金200804870009;国家自然科学基金30973148
2011-12-30(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
3005-3008