PP2R1A逆转录病毒的构建及对细胞周期的影响

摘要：

目的:构建重组PP2R1A基因的逆转录病毒感染HEKTER细胞,观察其定位,验证表达,研究过表达PP2R1A对细胞生长及周期的影响.方法:逆转录病毒裁体pMIG-Flag-PP2R1A-IRES-GFP与Pcl10A1瞬时共转染293T细胞,收集病毒感染HEKTER细胞,在荧光显微镜下观察定位,标记荧光单克隆.挑取不同表达强度单克隆做western验证PP2R1A蛋白表达.运用流式细胞分析、体外创伤试验及生长曲线试验研究单克隆细胞的增殖及周期.结果:获得了过表达PP2R1A的单克隆细胞株,PP2R1A在细胞内广泛表达,结合western及细胞试验证实PP2R1A高表达阻滞细胞周期并减慢细胞生长.结论:PP2R1A是丝苏氨酸蛋白磷酸酶PP2A的结构A亚基的a亚型,在细胞内广泛表达.本文成功构建了表达PP2R1A的细胞株,研究发现PP2R1A高表达会影响细胞生长及细胞周期,减缓了细胞增殖.为进一步深入研究PP2R1A对PP2A全酶活性及功能、细胞转化的影响奠定了重要的实验基础.

关键词：PP2R1A、单克隆、亚细胞定位、细胞周期

所属期刊栏目：11

分类号：Q75;Q78;Q253(分子遗传学)

资助基金：国家自然科学基金资助项目30971092

在线出版日期：2011-09-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1869-1872