双基因真核表达载体pIRES-BMP2-TGFβ3的构建与鉴定
目的:构建与鉴定骨形态发生蛋白BMP2和转化生长因子TGFβ3双基因真核表达载体pIRES-BMP2-TGFβ3.方法:首先,用PCR方法从质粒pGEMT/BMP2中扩增出BMP2基因全长,并将其连入双基因真核表达载体pIRES,得到质粒pIRES-BMP2,其次,从人胚胎组织提取总RNA,反转录成cDNA,以反转录的cDNA为模板,PCR扩增出TGFβ3基因全长,将TGFβ3基因连入质粒pIRES-BMP2;用酶切的方法筛选出阳性重组质粒,并进行测序鉴定.结果:酶切鏊定证明已将BMP2和TGFβ3两个基因连入载体中,测序结果完全正确.结论:成功构建PIRES-BMP2/TGFβ3双基因真核表达载体.
骨形态发生蛋白、转化生长因子、双基因真核表达载体
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Q75;Q78;R318(分子遗传学)
山东省自然科学基金ZR2009CM130;Y2006c19
2011-09-13(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
1639-1642