天然属性抗LDL及oxLDL IgM亚类抗体的制备与鉴定

摘要：

目的:制备天然属性抗低密度脂蛋白(LDL)及抗氧化低密度脂蛋白(oxLDL)IgM亚类抗体.方法:给予BabFl/c小鼠高胆固醇饮食,4周后取脾细胞直接与SP2/0细胞融合,以纯化的LDL及oxLDL为抗原,对阳性杂交瘤细胞生长孔进行间接ELISA筛选.鉴定杂交瘤上清的免疫球蛋白亚类,进而采用免疫沉淀和免疫印迹法对获得的抗体进行免疫学反应性鉴定.结果:杂交瘤细胞分泌的抗LDL及抗oxLDL的天然抗体通过ELISA法被筛选出来.可以与LDL或oxLDL发生高亲和力结合,经过4次克隆化.最终获得2株稳定分泌天然抗LDL的抗体,命名为5G8和2H7,及1株稳定抗oxLDL的抗体,命名为3A6,3株抗体均属于lgM亚类,无交叉反应,可以满足免疫印迹、免疫沉淀等实验要求.结论:成功制备了抗LDL及抗oxLDLtgM亚类抗体.为研究天然抗体在体内脂质代谢和相关心脑血管疾病如动脉粥样硬化等发生发展中的作用提供了重要的研究工具.

关键词：天然抗体、单克隆抗体、杂交瘤技术、低密度脂蛋白、氧化低密度脂蛋白

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分类号：Q95-3.R543.5(动物学)

资助基金：国家自然科学基金81070248

在线出版日期：2011-07-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1043-1047