内皮抑素转基因治疗子宫内膜异位症大鼠模型的实验研究
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内皮抑素转基因治疗子宫内膜异位症大鼠模型的实验研究

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目的:了解内皮抑素(ES)转基因治疗子宫内膜异住症大鼠模型的疗效.方法:构建子宫内膜异住症大鼠模型,选择建模成功的大鼠为实验研究对象,随机分为ES转染组(Ⅰ组 )24只、载体对照组(Ⅱ组 )20只和阴性对照组(Ⅲ组)20只.Ⅰ组病灶局部注射lipofectamine-endo-pBud复合物进行基因转染,Ⅱ组注射lipofectamine-pBud复合物,Ⅲ组注射PBS用于对照.通过实时荧光定量PCR法检测异位病灶中ES基因的相对表达量,用Western-blot测定ES-HA融合蛋白及ES蛋白的相对表达量,来判断转染成功与否.用ELISA法对大鼠血清中ES及血管内皮细胞生长因子(VEGF)水平进行测定,用免疫组化SP法对ES、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)以及微血管密度(MVD)的表达进行测定,用游标卡尺对转染前后各组大鼠异住病灶的长、宽进行测量,计算体积,分析各指标实验前后的差异,观察内皮抑素转基因治疗子宫内膜异位症大鼠模型的疗效.结果:注射相应试剂后2周,Ⅰ组异位病灶组织中Es基因的相对表达量高于两对照组(P<0.05),有ES-HA融合蛋白表达,且ES蛋白的相对表达量显著高于两对照组(P<0.01);Ⅰ组血清中ES水平显著高于两对照组(P<0.01),VEGF水平显著低于两对照组(P<0.01),三组ES与VEGF在血清中的表达水平呈负相关(r=0.805);Ⅰ组异位病灶组织中ES表达明显高于两对照组(P<0.01);MMP-2的表达明显少于两对照组(P<0.01);MVD明显少于两对照组(P<0.01);三组ES与MMP-2在异位内膜中的表达呈负相关(r=-0.700);Ⅰ组异位病灶体积明显小于两对照组(p<0.01)结论:阳离子脂质体LipofectamineTM2000介导的重组质粒endo-pBud病灶内直接注射法可以成功实现ES在子宫内膜异位症大鼠异位内膜中的表达,并对子宫内膜异位症大鼠模型有治疗作用.

子宫内膜异住症、大鼠模型、内皮抑素、基因、转染

11

Q95-3;R711.71(动物学)

2011-07-14(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)

1013-1019

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