慢病毒siRNA靶向干扰YAP基因胃癌细胞株的建立
目的:构建并鉴定YAP基因短发夹干扰RNA(shRNA)慢病毒载体,建立稳定干扰YAP基因表达的胃癌细胞株SGC7901.方法:荧光定量PCR检测YAP基因在多种胃癌细胞株中的表达情况.构建重组靶向YAP基因的shRNA慢病毒表达质粒PGC-shRNA-YAP.用脂质体转染的方法将栽体导入胃癌细胞.经杀稻瘟茵素筛选后,建立稳定表达siRNA的细胞株.荧光定量PCR检测干扰效率.结果:在胃癌细胞株SGC7901中,YAP基因显示高表达.测序验证PGC-shRNA-YAP重组质粒构建成功.将重组质粒稳定转染入胃癌细胞株SGC7901后能明显抑制YAPmRNA表达水平.结论:成功构建了PGC-shRNA-YAP慢病毒重组质粒,建立了靶向稳定干扰YAP基因表达的siRNA胃癌细胞株SGC7901.
YAP基因、慢病毒载体、胃癌细胞株SGC7901、RNA干扰
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Q28;Q75;Q78;R735.2(细胞生物学)
上海市科委动物实验基金重点项目10140902500
2011-07-05(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
605-610