幽门螺杆菌感染细胞模型的建立及感染相关microRNAs的筛选鉴定

摘要：

目的:建立稳定的幽门螺杆菌(H.pylori)感染人胃上皮细胞模型;筛选并鉴定H.pylori感染相关microRNAs(miRNAs)的表达,为深入研究感染相关miRNAs的调控作用机制奠定基础.方法:将H.pylori标准株按MOI=100∶1感染人胃上皮细胞,通过检测炎性细胞因子及炎症反应关键酶的表达综合评价感染模型;采用博奥公司miRNAs V3.0芯片分析细胞感染前后miRNAs表达谱变化,运用实时定量PCR技术和Northem杂交对表达显著差异的miRNAs进行分析鉴定.结果:H.pylori感染细胞24 h后,细胞分泌促炎细胞因子IL-8显著升高(P＜0.01);启动炎症反应的关键酶COX-2的表达明显增加.芯片数据显示:H.pylori感染引起超过2倍显著差异表达的miRNAs包括:表达上调的PREDICTED-MIR191、mir-155、miR-92b、miR-30b、miR-146a、miR-16等,和表达降低的miR-181b、miR-324.实时定量PCR和Northem杂交结果显示感染相关miR-155和miR-146a在H.pylori感染细胞模型中表达均显著增加(P＜0.01).结论:miR-155和miR-146a在感染细胞模型中的表达增加提示二者可能参与H.pylori感染的免疫调控过程.

关键词：幽门螺杆菌、胃上皮细胞、microRNAs、感染

所属期刊栏目：11

分类号：R373;Q75(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：国家自然科学基金30770113

在线出版日期：2011-05-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：18-21