B19病毒XA株VP1独特区真核表达系统的建立及鉴定

摘要：

目的:克隆B19病毒XA株VP1u基因,构建真核重组表达载体.方法:从已构建好的B19病毒XA株原核表达载体中获得VP1u基因,将其克隆入真核表达载体plRES2-EGFP中,经酶切鉴定并测序验证后,获得真核表达载体plRES2-EGFP-VP1u.将其转染至HeLa细胞,提取细胞总蛋白,用Western blot技术检测VP1u蛋白的表达.结果:成功构建了携带人B19病毒VP1u基因的真核表达载体plRES2-EGFP-VP1u,荧光显微镜下可见pIRES2-EGFP-VP1u转染HeLa细胞后表达EGFP蛋白而发出绿色荧光,Western blot证明VP1u蛋白在HeLa细胞中表达.结论:成功构建了携带人B19病毒VP1u基因的真核表达载体plRES2-EGFP-VP1u并在HeLa细胞中正确表达,为今后B19病毒VP1u基因疫苗的研究奠定基础.

关键词：VP1u基因、基因克隆、表达载体

所属期刊栏目：10

分类号：R373;Q75;Q78(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：国家自然科学基金81070543

在线出版日期：2011-04-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：4401-4403