抑制Notch-1基因表达的siRNA重组腺相关病毒载体的构建及滴度测定

摘要：

目的:构建并制备携带靶向干扰Notch-1基因shRNA的重组腺相关病毒载体.方法:设计针对Notch-1的靶DNA序列,构建重组质粒pAAV-MCS2/siRNA-Notch-1,将该质粒和腺相关病毒包装质粒pAAV-RC,腺病毒辅助质粒pHelper共转染QBI-293A细胞,包装成带有Notch-1基因的重组腺相关病毒.结果:PCR鉴定分析结果表明成功构建针对Notch-1的siRNA重组腺相关病毒载体,滴定法测定重组病毒载体基因组得到滴度为1.2x 1012VP/L的高滴度腺相关病毒.结论:成功构建携带Notch-1基因短发夹状干扰RNA的腺相关病毒载体,为探索Notch-1基因在胶质母细胞瘤肿瘤干细胞中的作用提供实验基础.

关键词：Notch-1基因、小RNA、重组腺相关病毒

所属期刊栏目：10

分类号：R730.231;Q75;Q78(肿瘤学)

资助基金：山东省自然科学基金项目Y2008C58

在线出版日期：2011-01-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：3823-3826