用于活体影像技术稳定表达荧光素酶的肺癌细胞系的建立

摘要：

目的:建立稳定表达萤火虫荧光素酶的人肺癌细胞系并进行体外验证.方法:亚克隆萤火虫荧光素酶基因到真核表达载体pRc/CMV2上,构建重组质粒pRc/CMV2.1uc+,转染到肺癌细胞株spc-a-1,经过G418筛选获得单细胞抗性克隆.抗性克隆连续传代,并通过荧光素酶活性检测筛选出高水平表达荧光素酶的稳定细胞克隆,在体外检测细胞的生物发光能力与细胞数量的相关性.结果:构建的pRc/CMV2-1uc+真核表达质粒转染spe-a-1细胞后,经G418筛选出多个抗性克隆;传代至40代时确定有3株细胞的荧光素酶活性最高;活体影像系统体外检测证实阳性细胞株发光强度与数量呈正相关.结论:结果表明成功构建了稳定表达萤火虫荧光素酶的spc-a-1细胞系.

关键词：细胞克隆、荧光素酶、肺癌细胞spc-a-1、G418

所属期刊栏目：10

分类号：R734.2;Q754;Q785(肿瘤学)

资助基金：广东省自然科学基金06301124;广州市属高校科技项目61093

在线出版日期：2010-07-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1658-1660