人类博卡病毒(HBoV)非结构蛋白NS1基因的克隆、原核表达及多克隆抗体的制备

摘要：

目的:克隆、表达、纯化人类博卡病毒(HBoV)非结构蛋白NS1,制备抗NS1多克隆抗体.方法:利用PCR扩增HBoV非结构蛋白NS1基因,将其克隆至pMAL-c2X表达载体上,重组质粒转化大肠杆菌DH10B,IPTG诱导表达.表达的融合蛋白经AmyloseResin亲和层析柱纯化后,免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体.用间接ELISA法检测抗体效价.结果:原核表达融合蛋白MBP-NS1,并获得了其多克隆抗体,抗体效价达到1:32000.结论:在原核表达系统中表达、纯化了融合蛋白,制备抗NS1多克隆抗体,为进一步研究该病毒非结构蛋白基因的转录和翻译机制提供可靠的工具.

关键词：人类博卡病毒(HBoV)、非结构蛋白NS1、克隆、原核表达、多克隆抗体

所属期刊栏目：10

分类号：Q75;Q78(分子遗传学)

资助基金：国家自然科学基金30670081

在线出版日期：2010-09-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1013-1016