肺泡Ⅱ型上皮细胞自噬体与结核分枝杆菌相互作用的研究
目的:检测LC3在肺泡Ⅱ型上皮细胞A549上的表达情况,及结核分枝杆菌刺激后对其表达的影响,探讨自噬在结核分枝杆菌感染上皮细胞中所起的作用.方法:体外培养肺泡Ⅱ型上皮细胞A549,在结核分枝杆菌感染A549细胞0h,24h分别提取RNA,采用RT-PCR的方法检测LC3mRNA的表达情况.采用凋亡坏死染色试剂盒在结核分枝杆菌感染24h后检测对照组,3-MA组,MTB组和3-MA+MTB组的细胞坏死情况.在结核分枝杆菌感染A549细胞4h,8h,16,24h采用Non-Radioactive Cytocity Assay的方法检测对照组,3-MA组,MTB组和3-MA+MTB组上清液LDH的OD值.结果:LC3在肺泡Ⅱ型上皮细胞显著表达,结核分枝杆菌感染后LC3表达降低.细胞凋亡和坏死染色结果显示空白组和3-MA组没有明显差异(P>0.05),MTB组和3-MA+MTB组有明显差异(P<0.05).LDH检测显示MTB组和3-MA+MTB组上清液LDH的OD值数据两两之间有明显差异(P<0.05)并且有时间依赖性.结论:肺泡Ⅱ型上皮细胞自噬体在抵抗结核分枝杆菌的感染过程中起一定的作用.
LC3、结核分枝杆菌、肺泡Ⅱ型上皮细胞、3-MA、自噬体
10
R378.91+1(医学微生物学(病原细菌学、病原微生物学))
国家自然科学基金面上项目30872358
2010-09-15(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
810-813