ROCK Ⅰ/Ⅱ基因下调对血管平滑肌细胞迁移及增殖的影响
目的:探讨ROCK亚型ROCK Ⅰ和ROCKⅡ对血管平滑肌细胞(A7r5)迁移及增殖的影响.方法:利用Western blot技术检测ROCK Ⅰ和ROCKⅡ蛋白在A7r5细胞中的表达水平;利用siRNA技术使ROCK Ⅰ和ROCKⅡ基因表达分别下调,并检测基因下调后蛋白表达水平;利用Boyden小室法,观察ROCK Ⅰ和ROCKⅡ基因下调后及RocK特异抑制剂Y-27632对PDGF诱导的A7r5细胞迁移的影响:使用MTT法检测ROCK Ⅰ和ROCKⅡ基因下调后对A7r5细胞生长曲线的影响.结果:ROCK Ⅰ和ROCKⅡ在A7r5细胞中的蛋白表达水平不同,ROCKⅡ较ROCK Ⅰ的表达水平高4倍;通过对A7r5细胞进行ROCK Ⅰ和ROCKⅡ siRNA转染,使二者蛋白表达水平分别下调83.4%和94.7%;基因表达下调后,ROCK Ⅰ明显抑制了PDGF诱导的A7r5细胞的迁移,而ROCKⅡ无明显影响,Y-27632也抑制了A7r5细胞的迁移;ROCK Ⅰ和ROCKⅡ基因下调后对A7r5细胞生长曲线的影响无明显差别.结论:ROCK Ⅰ在血管平滑肌细胞迁移过程中起主导作用,ROCK Ⅰ和ROCKⅡ对血管平滑肌细胞的增殖作用无明显差异.
ROCKⅠ/Ⅱ、血管平滑肌细胞、细胞迁移、增殖
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Q342;Q593(遗传学分支学科)
辽宁省教育厅科技项目20060196;辽宁省科技厅自然科学基金20072166
2010-03-29(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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3232-3234,3271