MMP-7基因真核表达载体的构建及其在HeLa细胞中的表达与鉴定

摘要：

目的:构建MMP-7基因真核重组质粒,检测并鉴定MMP-7在人宫颈癌HeLa细胞中的表达.方法:提取宫颈癌组织总RNA,通过基因克隆构建MMP-7基因真核表达重组质粒pcDNA3.1(+)/MMP-7,酶切、PCR及基因测序鉴定,用阳离子脂质体介导采用基因转染技术转染人宫颈癌Hela细胞,RT-PCR检测外源基因的表达、间接免疫荧光法检测对表达产物进行鉴定.结果:成功构建了重组表达质粒pcDNA3.1(+)/MMP-7并转染了人宫颈癌Hela细胞,通过RT-PCR可以检测到MMP-7 mRNA在Hela细胞中的表达,经间接免疫荧光反应可检测到明显的阳性反应,而转染空载体组表达阴性.结论:构建的重组质粒peDNA3.1(+)/MMP-7能在Hela细胞中表达,为该蛋白在人子宫癌后续的功能研究奠定了基础.

关键词：MMP-7、重组质粒、Hela细胞、基因表达

所属期刊栏目：9

分类号：R-332;R322.61(医学研究方法)

资助基金：湖南省教育厅科研基金资助项目03C415,04B057;湖南省自然基金资助04JJY093

在线出版日期：2009-12-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：2535-2537