金黄色葡萄球菌一氧化氮合酶基因(nos)缺失突变株的构建

摘要：

目的:构建金黄色葡萄球菌一氧化氮合酶基因(nos)缺失突变株.方法从金黄色葡萄球茵RN6390的基因组DNA中扩增了mos基因的上、下游片段;以大肠杆茵和金黄色葡萄球菌穿梭质粒pMAD(含有温度敏感性的复制起点,红霉素抗性基因(erm)和β-半乳糖苷酶基因(bgaB)为筛选标记)为骨架,构建基于nos基因位点的同源重组载体pMADAnos,该载体经金黄色葡萄球茵RN4220修饰后再转入金黄色葡萄球菌RN6390.经过在30℃和42℃交替培养,通过抗生素抗性和β-半乳糖苷酶活性筛选nos基因缺失突变株.结果筛选得到的突变菌株,经基因组PCR、定量PCR及序列分析表明,金黄色葡萄球茵RN6390基因组中的nos基因被成功地敲除.结论利用同源重组的方法构建了金黄色葡萄球菌RN6390nos缺失突变株,为金黄色葡萄球菌nos基因功能的研究奠定了基础.

关键词：金黄色葡萄球菌、一氧化氮合酶、同源重组

所属期刊栏目：8

分类号：R378.11(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：国家高技术研究发展计划863计划2007AA09C418

在线出版日期：2009-03-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：1845-1848