DNA聚合酶iota在HEK-293细胞中高表达体系的建立

摘要：

目的:将带有DNA聚合酶iota(DNA Polymerase iota,Polι)目的基因的真核表达质粒PCDNA3.1转入HEK-293细胞,建立DNA聚合酶iota在HEK-293细胞中的高表达体系,为进一步研究DNA聚合酶在DNA损伤修复中的生物学功能奠定了基础.方法:用脂质体2000(Lipofectamine2000)将带有目的基因的真核表达质粒PCDNA3.1转入HEK-293细胞,通过G418筛选抗性克隆,用一步法提取细胞总RNA,采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术检测出高表达克隆.结果:通过G418筛选筛选出了具有G418抗性的克隆,通过RT-PCR技术检测出高表达DNA聚合酶iota的HEK-293细胞系.结论:建立了高表达DNA聚合酶iota的HEK-293细胞系.为进一步研究DNA聚合酶在DNA损伤修复中的生物学功能奠定了基础.

关键词：DNA聚合酶iota、HEK-293细胞、DNA损伤、DNA修复

所属期刊栏目：8

分类号：Q78;Q813(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家自然科学基金30770460;中国人民解放军医药卫生科研基金06H026

在线出版日期：2008-07-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：1267-1269