小鼠破骨细胞诱导及成纤维生长因子受体表达检测

摘要：

目的:检测成纤维生长因子受体(fibroblast growth factor receptors,FGFRs)在小鼠破骨细胞中的表达情况,为探讨FGFRs时破骨细胞的直接调控作用奠定基础.方法:采用巨噬细胞集落刺激因子(macrophage colony stimulating factor,M-CSF)和破骨细胞分化因子(receptor activator of nuclear factor-B ligand,RANKL)诱导小鼠骨髓单核细胞分化为破骨细胞.提取细胞总RNA后经逆转录获得小鼠破骨细胞cDNA,根据FGFRs基因编码区序列设计的引物进行PCR扩增并对PCR扩增产物进行测序.为进一步验证转录水平的结果,提取细胞总蛋白电泳后进行免疫印迹实验.结果:诱导5d后可见TRAP(+)多核细胞出现,小鼠破骨细胞在转录水平和翻译水平均只可检测到FGFR1和FGFR3基因的表达产物.结论:M=CSF和RANKL可成功诱导出小鼠破骨细胞,FGFR1和FGFR3基因在小鼠破骨细胞中均有表达.

关键词：破骨细胞、成纤维生长因子受体、RT-PCR、Western blot

所属期刊栏目：8

分类号：Q813(生物工程学(生物技术))

资助基金：国家重点基础研究发展规划资助项目"973"项目2005CB522604;国家自然科学基金杰出青年基金资助项目30425023;国家自然科学基金重点资助项目30530410

在线出版日期：2008-07-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：1046-1048