10.3969/j.issn.1673-6273.2008.05.008
MIC3-EGFP融合蛋白真核表达质粒的构建及其在COS-7细胞中的表达
目的:构建以绿色荧光蛋白(greenfluoreseeneeprotein,GFP)为报告基因的重组表达质粒pEGFP-C2-MIC3并检测MIC3-EGFP融合蛋白其在COS-7细胞中的表达及定位.方法:通过基因重组的方法构建pEGFP-C2-MIC3重组真核表达质粒,并通过酶切和基因测序鉴定.脂质体法转染体外培养的COS-7细胞,转染后24h在活细胞状态下用倒置荧光显微镜直接观察MIC3-EGFP融合蛋白在COS-7细胞中的分布.结果:PCR检测,酶切鉴定及测序证实目的基因MIC3正确连接到pEGFP-C2的多克隆位点.pEGFP-C2-MIC3重组体转染COS-7后,在细胞质表达.结论:成功地构建了pEGFP-C2-MIC3融合蛋白真核表达质粒,在COS-7细胞中获得表达.
刚地弓形虫、MIC3、GFP表达载体、表达定位
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R711.76(妇产科学)
国家自然科学基金资助项目No.30371260.湖南省"十一.五"重大专项2006SK1001;湖南省"十一.五"重点学科建设经费联合资助
2008-07-28(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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825-827,封3