猪脂肪GLUT4蛋白的大量提取纯化及鉴定

摘要：

目的:寻找提取纯化具有12次跨膜结构的葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)的新方法,并通过晶体结构的解析来研究二型糖尿病的发生机制.方法:首次选用猪肉皮下脂肪作为GLUT4蛋白提取的原材料,采用组织匀浆,差速离心方法初步提取分离了富含GLUT4的组分,进一步通过硫酸铵沉淀法初步纯化到大量的GLUT4蛋白.结果:通过单抗1F8对每一个组分进行Western Blot检测,证明了分子量55kD处的蛋白即是GLUT4.150g脂肪组织通过组织匀浆和差速离心后,于35%-55%的硫酸铵沉淀浓度范围内得到40mg纯度达到50%的GLUT4.纯化后的GLUT4可以在0.5%DM下稳定存在三天.结论:发展了快速有效提取GLUT4的新方法,为进一步蛋白结晶打下基础.

关键词：葡萄糖转运蛋白4、组织匀浆、硫酸铵沉淀

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分类号：Q503(一般性问题)

资助基金：国家重点基础研究发展计划973计划2004CB720000;2006CB0D1704

在线出版日期：2007-10-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：1284-1285,1302