大鼠脑组织中P-糖蛋白的免疫印迹检测方法

摘要：

目的:确定蛋白免疫印迹检测大鼠脑组织中P-糖蛋白的最佳实验条件.方法:将成年雄性Wistar大鼠随机分为正常组和模型组.模型组分八个时间点,采用反复夹闭颈总动脉辅以硝普钠降压的方法制备脑缺血再灌注模型.正常组直接断头取脑分别进行组织匀浆和提取微血管,而模型组断头取脑均提取微血管,利用蛋白免疫印迹检测大鼠脑内P-糖蛋白的表达水平.结果:最佳实验条件是:提取微血管,用裂解液C冰上裂解30min,然后40000g离心30min留上清,蛋白定量后在5*上样缓冲液中25℃处理30min.而模型组各时间点P-糖蛋白的表达量随时间的延长逐渐增多.结论:利用提取脑微血管的方法在上述实验条件下进行P-糖蛋白的检测方便、可行,明显优于脑组织匀浆;并且在脑缺血再灌注这种病理状态下脑组织内P-糖蛋白的表达呈现一定的时序特征.

关键词：P-糖蛋白、蛋白免疫印迹、检测方法、脑缺血再灌注、微血管

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分类号：Q593.2

资助基金：国家自然科学基金面上项目课题30300469;北京市科技新星计划项目2006A48

在线出版日期：2007-06-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：329-331