HBV X区基因部分序列的亚克隆与PCR检测

摘要：

目的:探讨HBV X区基因用于乙型病毒性肝炎早期诊断价值和意义.方法:设计特异性引物,将pBR322-HBV质粒X区部分序列PCR 产物AT亚克隆至pBS-T载体,提取和纯化质粒DNA,再对HBV X区序列进行PCR扩增.结果:获得了预期希望的质粒.PCR的最佳退火温度为51 ℃,灵敏度达到101拷贝/2μl,线性范围101-1010拷贝/2μl.讨论:pBR322-HBV 质粒中的靶基因成功地被亚克隆至pBS-T载体.pBR322-HBV中X区目的序列扩增产物为57bp,该小片段勿需纯化就可直接AT亚克隆至新载体,有利于后续的常规PCR检测和TaqMan MGB荧光定量PCR检测.

关键词：乙型肝炎病毒、X区基因、亚克隆、灵敏度

所属期刊栏目：6

分类号：Q3(遗传学)

资助基金：国家自然科学基金40172005

在线出版日期：2006-09-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：4-6,9