植物罹病组织中南方、爪哇、花生根结线虫的 LAMP快速检测

摘要：

[目的]建立一种基于环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)技术,从植物罹病组织中直接检测3种常见的根结线虫,为根结线虫的监测和防治提供技术支持.[方法]分别采用3种根结线虫的种类特异性引物对所选择的根结线虫的DNA片段进行PCR扩增,扩增产物纯化、回收并测序.根据3种根结线虫的测序结果,针对种类特异区段,采用PrimerExplorerV4软件,分别设计3种根结线虫的LAMP引物.设计的引物组人工合成后,以提取的纯化种群线虫DNA为模板,分别进行引物组的特异性测试,筛选出分别针对3种根结线虫的最佳引物组.[结果]研究设计的3种根结线虫的LAMP特异性引物能够直接从植物根结中检测出南方、花生、爪哇3种常见根结线虫,LAMP快速检测体系为:dNTPS浓度为1 mmol·L-1,Mg2+的浓度为5 mmol·L-1,不添加甜菜碱,反应时间为45 min.[结论]本实验建立的南方、花生、爪哇根结线虫LAMP快速分子检测方法,具有特异性强、灵敏度高、简单、快速、经济等特征,能够从罹病植物组织中快速准确地检测出南方、花生和爪哇根结线虫,具有极高的实践应用价值.

关键词：环介导等温扩增、根结线虫、特异性、快速检测

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资助基金：口岸及边贸区、自贸区入侵生物本底调查与动态分布2016YFC1202104;国家自然科学基金31560502、311060361

在线出版日期：2019-04-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：59-64