基于16SrDNA基因的谷斑皮蠹PCR检测技术

摘要：

[目的]谷斑皮蠹是一种重要的检疫性害虫,在新疆周边多个国家分布,口岸检疫人员多次从进境货物中截获谷斑皮蠹,该虫对新疆的农业生产极具威胁.[方法]以谷斑皮蠹的16S rDNA基因为靶序列,用昆虫通用引物对4种供试皮蠹进行PCR扩增,将扩增产物进行克隆和测序,用生物软件设计检测谷斑皮蠹的特异性引物与探针.[结果]设计的特异性引物(TG-SNP-F/TG-SNP-R)及所建立的常规PCR方法能有效检测出谷斑皮蠹,其扩增产物的片段大小为250 bp,灵敏度为3 ng·μL-1.设计的特异性引物(TG-F/TG-R)和探针(TG-probe),以及所建立的实时荧光PCR方法,对谷斑皮蠹的检测特异性强,灵敏度达0.8 fg·μL-1.[结论]建立的常规PCR方法和实时荧光PCR检测方法能够对谷斑皮蠹进行准确鉴定,为口岸检疫人员检测进境货物中携带的谷斑皮蠹提供技术支持.

关键词：谷斑皮蠹、16SrDNA、常规PCR、实时荧光PCR

所属期刊栏目：26

分类号：S43;S4

资助基金：国家质检公益性行业科研专项201310091

在线出版日期：2017-04-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：75-79