一种适合稻水象甲双向电泳的蛋白质提取方法

摘要：

[背景]蛋白样品制备是2-DE蛋白组学研究的关键步骤,无杂质、高纯度的蛋白样品是获得良好的2-DE结果的基础.选择合适于昆虫蛋白组学研究的常规蛋白提取方法是2-DE研究的前提.[方法]通过饱和酚法和TCA-丙酮法提取稻水象甲成虫总蛋白,比较2种方法的优缺点,以回避昆虫组织蛋白提取时可能出现的问题.[结果]TCA-丙酮法的蛋白质产率(14.55 μg·mg-1)显著高于饱和酚法(9.30 μg·mg-1),2种方法获得的SDS-PAGE条带结果相近,且高丰度表达蛋白在TCA-丙酮中更高表达;饱和酚的2-DE图谱蛋白点清晰,TCA-丙酮法2-DE图谱蛋白点规则但背景模糊,出现多条横纹.[结论与意义]饱和酚法适合稻水象甲成虫蛋白组学的研究.这2种方法也能适用于其他昆虫,但不同的昆虫体内有不同的干扰组分来干扰蛋白质的提取,所以获得的蛋白纯度及提取得率可能并不一样.试验结果说明了2种蛋白提取方法对2-DE研究的影响,并为稻水象甲成虫的蛋白组学研究提供了一定的参考依据.

关键词：2-DE、蛋白提取、稻水象甲、TCA-丙酮、饱和酚

所属期刊栏目：25

分类号：TS2;R28

资助基金：国家转基因重大专项2014ZX0801101B;国家自然科学基金项目31201576;吉林省科技发展计划项目20150309006NY、20130102045JC

在线出版日期：2016-06-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：143-147