应用 PCR 法对小麦叶疫病菌的检测

摘要：

【背景】小麦叶疫病菌于20世纪60年代入侵我国后，迅速传播扩散并在局部区域造成严重危害，对我国小麦的健康发展构成了巨大威胁。【方法】设计出检测小麦叶疫病菌的特异性引物，建立快速检测该病菌的PCR方法。用真菌通用引物ITS4／ITS5对小麦叶疫病菌进行PCR扩增，将扩增产物进行克隆和测序，使用DNAMAN软件设计出检测该病菌的特异性引物 LJY1和LJY2，优化PCR反应体系。【结果】建立了该病菌的PCR检测方法，PCR反应体系：25 mmol· L－1 MgCl22．5μL，10 mmol· L－1 dNTP 1．0μL，10μmol· L－1引物各0．5μL，DNA模板8 ng，最佳退火温度57．6℃。【结论与意义】该方法可以准确地将小麦叶疫病菌与其他链格孢属的真菌区分开。本研究结果为小麦叶疫病的快速检测提供了依据，能够有效防止该病菌在小麦进出口贸易中传入我国。

关键词：小麦叶疫病菌、PCR、体系优化、引物LJY1和LJY2

分类号：S41;S66

资助基金：国家质检公益性行业科研专项201310091

在线出版日期：2015-05-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：72-77