黄颡鱼免疫球蛋白M重链基因原核表达研究

摘要：

在前期研究克隆得到黄颡鱼(elteobagrus fulvidraco)全长eDNA的基础上,为进一步研究黄颡鱼免疫球蛋白M(IgM)重链的生物学功能,设计特异性引物PCR扩增获得了编码成熟免疫球蛋白M重链基因的编码序列.将该基因编码片段连接到原核表达载体pQE30中,构建黄颡鱼IgM重链的重组表达质粒IgM-pQE30.该重组质粒经酶切和测序鉴定后,转入表达宿主大肠杆菌M15中诱导表达,在30℃下,经0.2 mmol/L IPTG诱导表达8h,可获得大量以包涵体形式存在的黄颡鱼IgM重链蛋白,经SDS-PAGE电泳和Western blotting分析表明,新增的62 kDa蛋白条带与预期值相符,且能与鼠源抗6×His的单克隆抗体特异性结合,证明黄颡鱼IgM重链基因获得了高效原核表达.为进一步纯化该蛋白制备特异抗体,研究其生物学功能奠定了基础.

关键词：免疫球蛋白M、重链、重组质粒、原核表达、黄颡鱼

所属期刊栏目：32

分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家自然科学基金项目40576056,40976066,31170474;中央高校基本科研业务费专项资金资助21612111

在线出版日期：2013-07-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：44-50