枯草芽孢杆菌Mn-SOD基因的克隆及原核表达

摘要：

为了实现Mn-SOD基因在大肠杆菌(E.coli)中的可溶性表达,根据枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)168sodA核酸序列设计引物,以枯草芽孢杆菌ATCC 9372基因组为模板,PCR扩增获得了Mn-SOD基因.将此基因重组至原核表达载体pET-28a,构建含Mn-SOD基因的重组表达质粒,并转化至大肠杆菌BL21(DE3).异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达获得Mn-SOD,蛋白分子量约为26kD,占全菌蛋白的45.6%.改良的连苯三酚自氧化法测定SOD活力,菌体可溶性总蛋白SOD比活为51.09U·mg<'-1>,是对照组的4.84倍.枯草芽孢杆菌ATCC 9372 Mn-SOD基因在大肠杆菌BL21 (DE3)中首次成功表达,产物具有较高的可溶性和活性,为大量制备Mn-SOD奠定了基础.

关键词：枯草芽孢杆菌、Mn-SOD、原核表达、活力

所属期刊栏目：30

分类号：Q781(基因工程（遗传工程）)

资助基金：暨南大学自然科学基金640073

在线出版日期：2011-09-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：174-177