两个与中华拟同形溞生殖相关基因的筛选及其RNA干扰研究

摘要：

为了筛选与中华拟同形溞(Daphnia sinensis)生殖相关的基因,选择4个生长阶段的中华拟同形溞(雌性幼溞JF、成熟前1龄雌溞BM、第1成龄雌溞MA和第4成龄雌溞RF)进行转录组测序.在BM vs.JF、MAvs.JF、RFvs.JF、RFvs.MA、MA vs.BM、RF vs.BM等6个组合中,选择每个组合的前30个上调基因进行筛选,获得了 163个差异表达基因.这些差异表达基因以鱼类信息素培养的第4成龄雌溞为样本进行RT-qPCR检测,共筛选出19个与生殖相关的候选基因,选择其中2个基因(Cluster-13168.32243,Dsussp和Cluster-13168.22885,Dsmapk)进行RNAi实验.在RNAi后,Dsussp和Dsmapk基因的表达量在含有其dsRNA的大肠杆菌(Escherichia coli)浓度组均显著小于对照组(Enhanced Green Fluorescent Protein,EGFP),且与EGFP组相比,Dsmapk和Dsussp基因的表达量在2％和5％大肠杆菌浓度组分别下降了28.1％和32.3％、41.1％和55.6％.在RNAi后,中华拟同形溞在Dsussp和Dsmapk组的怀卵数及产幼溞数与对照组相比均减少,且5％大肠杆菌浓度组均小于2％大肠杆菌浓度组.随着龄数的增加,RNAi对中华拟同形溞怀卵数和产幼溞数的抑制影响均加强.因此,Dsussp和Dsmapk基因被证实在中华拟同形溞的生殖发育中起重要作用.

关键词：RNA干扰、生殖、转录组测序、中华拟同形溞

所属期刊栏目：48

分类号：Q958(动物学)

在线出版日期：2023-11-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：176-184