多聚左旋赖氨酸包被玻片的可视化检测方法

摘要：

分子量15万-30万的多聚左旋赖氨酸(Poly-L-Lysine,PLL)常被用于盖玻片的包被,以促进培养细胞贴壁或切片组织黏附.然而,用市场上劣质的PLL将使组织或细胞不能牢固黏附在包被玻片上,进而导致实验失败.因而,建立实用直观的PLL质量检测方法,对于PLL包被玻片的质量控制至关重要.然而,目前世界上未见相关方法报道.因此,作者本着实用原则建立了一种实验室可视化检测盖玻片表面PLL的方法,这种方法利用化学反应将异硫氰酸荧光素(Fluorescein isothiocyanate,FITC)添加到PLL的侧链氨基(-NH2)上,再利用荧光成像检测附着在玻片表面的FITC-PLL,同时荧光照片也可以通过Fiji软件进行分析,获得定量的检测结果.利用此方法,研究发现利用不同浓度的PLL包被盖玻片后,PLL偶联的FITC荧光强度和PLL浓度成正相关.通过检测市面上的两种商品化PLL,与对照相比,两种商品化PLL附着密度极低,推断利用这两种不合格的PLL包被玻片,将导致切片样本从玻片上脱落.此方法适用于实验室自制或商品化PLL黏附盖玻片质量的可视化检测,也为附着在玻璃或塑料表面的带有-NH2基团物质的定量检测方法的建立提供参考.

关键词：多聚左旋赖氨酸、盖玻片、组织切片、荧光成像、可视化检测

所属期刊栏目：47

分类号：Q-336(生物科学的研究方法与技术)

资助基金：国家自然科学基金;淡水生态与生物技术国家重点实验室资助

在线出版日期：2023-04-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：624-627