池蝶蚌HsPif基因的克隆及表达分析

摘要：

为了探究池蝶蚌(Hyriopsis schlegelii)酸性基质蛋白Pif基因的基本功能,研究通过RACE-PCR技术首次在池蝶蚌中获得了Pif基因的cDNA全长序列,命名为HsPif,其全长为3457 bp,5'端非翻译区(5'UTR)为485 bp,3'端非翻译区(3'UTR)为363 bp,开放阅读框(ORF)3072 bp,共编码1023个氨基酸,生物信息学分析结果显示HsPif蛋白含有一个von-Willebrand因子A型结构域和三个几丁质结合结构域;氨基酸组成成分结果表明天冬氨酸含量最高,组氨酸含量最低;HsPif蛋白亲水指数为-0.566,为亲水蛋白.构建系统进化树分析显示Pif基因保守性较高,与三角帆蚌(Hyriopsis cumingii)Pif相似度最高,且与其他贝类在同一个大支上.组织荧光定量PCR结果表明:HsPif基因主要在外套膜中表达;分子原位杂交显示杂交反应主要在外套膜上皮细胞发生.进行植核手术后进行qPCR检测HsPif基因的表达量变化,实验结果表明,HsPif基因可能与珍珠层的分泌有关,有助于进一步了解珍珠形成的机制,为珍珠养殖提供参考.

关键词：HsPif、基因克隆、原位杂交、植核、组织表达、珍珠囊、池蝶蚌

所属期刊栏目：47

分类号：Q344+.1(遗传学分支学科)

资助基金：国家重点研发计划;现代农业产业技术体系

在线出版日期：2023-02-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：339-344