miR-194a介导饲料维生素D3调节黄颡鱼JAK-STAT免疫通路的研究

摘要：

为了研究miRNA如何介导饲料维生素D3在黄颡鱼(Pelteobagrus fulvidraco)JAK-STAT通路中调节免疫应答的机制,选择黄颡鱼幼鱼为主要研究对象,设计了3组维生素D3浓度分别为1120、3950和16600 IU/kg的饲料,开展了为期12周养殖实验,养殖实验结束后进行鮰爱德华氏菌(Edwardsiella ictaluri)攻毒实验.对攻毒后的头肾和脾脏组织进行Illumina高通量测序,筛选差异表达的miRNAs,并对差异表达miRNAs进行靶基因的生物信息学预测和富集分析,发现miR-194a的靶基因富集在JAK-STAT信号通路中;进一步通过双荧光素酶报告基因实验验证了miR-194a对靶基因jak2a和tyk2具有靶向性调控的关系,能够发挥对jak2a和tyk2的抑制作用;通过体外巨噬细胞实验,在细胞中同样检测到miR-194a可以响应培养基中不同浓度的活性维生素D3,并对靶基因jak2a与tyk2同样发挥抑制作用;通过进一步对靶基因在JAK-STAT通路中的下游基因表达检测,发现随着JAK-STAT信号通路的激活,抗炎症反应(AIR)因子及被其诱导激活的靶基因的表达量随着培养基中维生素D3浓度升高呈现上升趋势(P<0.05),炎症通路NF-κB通路被抑制(P<0.05),促炎因子IL-1β、IL-6和TNF-α等表达量显著下降(P<0.05),并且调节了巨噬细胞由M1型极化向M2型极化的转变(P<0.05).研究结果发现miR-194a能在体内体外实验中响应维生素D3的变化,维生素D3通过促进miR-194a的表达,负调控靶基因jak2a和tyk2,并对JAK-STAT通路中的下游基因发挥间接作用,阐释了miR-194a介导饲料维生素D3通过JAK-STAT信号通路调控黄颡鱼免疫应答的机制.

关键词：维生素D3、miR-194a、JAK-STAT信号通路、免疫应答

所属期刊栏目：47

分类号：S942.1(水产保护学)

资助基金：国家自然科学基金31672667

在线出版日期：2023-02-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共14页

页码：11-24