草鱼IL-10单克隆抗体的制备与鉴定

摘要：

白细胞介素10(Interleukin-10,IL-10)参与机体免疫应答调节,协同其他细胞因子维持免疫系统稳态.为探究草鱼(Ctenopharyngodon idella)IL-10的细胞来源,研究利用大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)表达系统制备了高纯度的草鱼IL-10重组蛋白,免疫小鼠制备单克隆抗体后通过免疫印迹、激光共聚焦和流式细胞术对抗体进行分析.结果表明,获得的单克隆抗体不仅能特异识别大肠杆菌表达的CiIL-10重组蛋白,而且能识别HEK293细胞中表达的真核IL-10重组蛋白.脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)和草鱼白细胞介素1β(IL-1β)刺激草鱼性腺细胞系(GCO)36h的免疫荧光染色分析表明,草鱼IL-10单克隆抗体能与草鱼内源IL-10结合,但IL-10阳性细胞数量在LPS处理前后无明显变化.该研究成功制备了高纯度CiIL-10重组蛋白,获得了特异性好的高质量单克隆抗体,为研究草鱼ILC2和Th2细胞的增殖、分化和功能奠定了基础.

关键词：细胞因子、白介素10、单克隆抗体、免疫分析、草鱼

所属期刊栏目：46

分类号：S942.5(水产保护学)

资助基金：草鱼辅助Th细胞免疫系统及其应答病毒感染的分子机理研究资助32030112

在线出版日期：2022-12-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：1867-1875