莱茵衣藻BBS8蛋白的原核表达、纯化及多克隆抗体的制备

摘要：

为制备一支高特异性的莱茵衣藻BBS8兔源多克隆抗体,研究首先在大肠杆菌中表达N-端6×His标签标记的BBS8融合蛋白(6×His∷BBS8)并对其进行镍柱纯化,而后将纯化所得6×His∷BBS8蛋白免疫新西兰大白兔.免疫3次后采集少量抗血清,利用间接ELISA法测定其效价为1∶102400.然后,利用protein A纯化珠对所得BBS8抗血清进行IgG亚型抗体富集,接着利用大肠杆菌表达和纯化所得N-端MBP标签标记的BBS8(MBP∷BBS8)对IgG抗血清进行抗原抗体亲和纯化.利用纯化后的anti-BBS8多克隆抗体对莱茵衣藻野生型CC-125和bbs8突变体藻种的全细胞蛋白提取物进行免疫印迹鉴定,所得anti-BBS8多克隆抗体特异性较高,适合用于后续莱茵衣藻BBS8蛋白功能的研究.

关键词：BBS8、多克隆抗体、莱茵衣藻、巴德-毕德氏症复合物

所属期刊栏目：46

分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)

资助基金：天津市自然科学基金重点项目;天津市科学技术局创新平台专项

在线出版日期：2022-09-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：1319-1324