草鱼呼肠孤病毒VP7蛋白单克隆抗体的制备与应用

摘要：

草鱼呼肠孤病毒(Grass carp reovirus,GCRV)是导致该病的主要病原,研究将Ⅰ型草鱼呼肠孤病毒GCRV-873株的外衣壳蛋白VP7基因进行原核表达,获得高度纯化VP7重组蛋白,通过免疫BALB/c小鼠,首次制备筛选得到高效价单克隆抗体.结果显示,GCRV-Ⅰvp7基因可在原核表达系统中高效表达,主要以包涵体形式存在,大小约为40 kD.免疫小鼠后筛选到了5株IgG类型阳性杂交瘤细胞株,其中3株亚型为IgG1,2株亚型为IgG2a.Western Blot实验和直接免疫荧光实验显示,该抗体可特异识别GCRV-873,并且ELISA检测原核重组蛋白的效价高达204800,亲和常数为4.04×109.研究制备的VP7蛋白单克隆抗体,为GCRV-Ⅰ病毒诊断技术开发及病毒感染机制的深入研究提供实验基础.

关键词：GCRV、VP7、原核表达、单克隆抗体、Western Blot、免疫荧光、草鱼

所属期刊栏目：46

分类号：S941.4(水产保护学)

资助基金：草鱼辅助Th细胞免疫系统及其应答病毒感染的分子机理研究资助32030112

在线出版日期：2022-09-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：1293-1300