鲤Pdcd6ip蛋白真核表达载体的构建及抗病毒功能研究

摘要：

为进一步研究程序性细胞死亡6互作蛋白Pdcd6ip(Programmed cell death 6-interacting protein)分子功能,探讨其表达对鲤春病毒血症病毒(Spring viraemia of carp virus,SVCV)增殖的影响,研究通过逆转录-聚合酶链式反应扩增得到两端带有Nhe I和EcoR I酶切位点的pdcd6ip编码片段,并将其克隆至真核表达载体pCI-neo上,构建了真核表达质粒pCI-pdcd6ip.获得的过表达质粒转染至EPC细胞后进行RT-qPCR和western blot检测Pdcd6ip的表达情况,并利用CCK-8法检测其对细胞增殖的影响.细胞转染后24h进行SVCV感染,检测Pdcd6ip过表达对SVCV增殖的影响.结果显示,Pdcd6ip蛋白真核重组质粒能够在EPC细胞中大量表达,转染后72h细胞活性较对照组无显著差异.同时,免疫荧光、RT-qPCR和western blot检测结果均显示,Pdcd6ip蛋白过表达后,SVCV M蛋白mRNA水平和蛋白表达水平较对照组显著下降,表明Pdcd6ip过表达显著抑制了SVCV的增殖.研究为抗SVCV药物的研发提供了新的研究基础和设计思路.

关键词：鲤春病毒血症病毒、Pdcd6ip蛋白、过表达质粒、细胞活性、抗病毒、鲤

所属期刊栏目：46

分类号：S941.4(水产保护学)

资助基金：上海市科技兴农重点攻关项目;上海市青年科技启明星计划;上海市自然科学基金;国家自然科学基金

在线出版日期：2022-06-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：529-536