宽鳍鱲胰岛素样生长因子-Ⅰ的克隆及繁殖期前后表达分析

摘要：

为探讨胰岛素样生长因子-Ⅰ(Insulin like growth factor-Ⅰ, IGF-Ⅰ)对宽鳍鱲(Zacco platypus)繁殖期前后生长性状的影响,开展了宽鳍鱲IGF-Ⅰ基因序列的克隆及表达定位分析.宽鳍鱲IGF-Ⅰ基因全长13707 bp,包含5个外显子、4个内含子, 其中5个外显子长度分别为222、160、182、36和829 bp; 内含子长度分别为1194、7771、254和1879 bp, 推测开放阅读框为486 bp, 编码161个氨基酸.实时荧光定量PCR(Real-time qPCR, RT-qPCR)结果显示,宽鳍鱲IGF-ⅠmRNA在肝脏组织中的表达水平最高,其次是性腺、脾脏、心脏和脑, 在肾脏中表达水平最低.在7—8月, 处于繁殖期的性成熟宽鳍鱲性腺中IGF-Ⅰ表达水平显著上升, 繁殖期过后回落至最低值.在其他组织中IGF-Ⅰ表达水平在生长发育过程和繁殖期前后波动不大, 且雄鱼大多数组织中IGF-Ⅰ基因平均表达水平高于雌鱼.荧光原位杂交技术(Fluorescence in situ hybridization, FISH)定位显示, 宽鳍鱲IGF-Ⅰ基因基本为胞浆阳性, 少数为核阳性, 在肝组织中呈全胞质性分布, 在性腺组织的精母细胞、卵泡膜及卵泡液中阳性表达.上述结果表明宽鳍鱲IGF-Ⅰ基因表达模式具有性别差异性, 推测精巢中IGF-Ⅰ在繁殖期的高表达是宽鳍鱲雄性成体大于雌性成体的原因之一.研究结果为宽鳍鱲的性二态和人工繁育的研究提供参考资料.

关键词：宽鳍鱲、胰岛素样生长因子-Ⅰ、克隆、序列分析、表达模式

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分类号：Q344+.1(遗传学分支学科)

资助基金：浙江省重点研发计划项目2019C02049和2020C02014

在线出版日期：2020-12-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：1182-1190