脊尾白虾血蓝蛋白大亚基基因的克隆及表达分析

摘要：

应用RACE技术克隆脊尾白虾血蓝蛋白大亚基基因,并通过攻毒实验揭示脊尾白虾血蓝蛋白基因的先天免疫防御作用,为脊尾白虾(Exopalaemon carinicauda)的免疫防治研究提供依据和思路.研究成功克隆了脊尾白虾血蓝蛋白大亚基基因全长cDNA序列,该大亚基cDNA全长2192 bp,开放式阅读框长2034 bp,5′非编码区长21 bp,3′非编码区长137 bp,将该基因命名为EcHcL.EcHcL编码667个氨基酸,前21个氨基酸组成信号肽,推测成熟肽的分子量为78.5 kD.Blast比对结果显示,由脊尾白虾血蓝蛋白EcHcL序列推导的氨基酸序列与日本沼虾、凡纳滨对虾血蓝蛋白氨基酸序列的同源性分别达到87％、73％,其M结构域氨基酸序列与斑节对虾、日本对虾等物种同源性性高达90％ 左右,由此推断该cDNA序列属于血蓝蛋白家族.组织表达分析结果显示,EcHcL基因在脊尾白虾鳃、卵巢、肝胰腺、心脏、肠、肌肉、胃、腹神经节、眼柄、血细胞中均有表达,肝胰腺中相对表达量最高.Real-time PCR分析发现EcHcL基因在金黄色葡萄球菌、副溶血弧菌和对虾白斑综合征病毒(WSSV)感染后脊尾白虾肝胰腺和血细胞中的表达量显著增加,并具有不同的时空表达模式,推测脊尾白虾EcHcL基因在免疫防御中具有重要作用.

关键词：脊尾白虾、血蓝蛋白大亚基、基因克隆、表达分析

所属期刊栏目：42

分类号：S917.4(水产基础科学)

资助基金：国家虾产业技术体系CARS-47;泰山产业领军人才工程LJNY2015002;国家自然科学基金31472275;青岛市产业培育计划科技惠民专项17-3-3-62-nsh;宁波市科技计划 2016C11011资助 [Supported by the Earmarked Fund for Modern Agro-industry Technology Research SystemCARS-47;the Program of Shandong Leading TalentLNJY2015002;the National Natural Science Foundation of China31472275;Qingdao Industrial Development Program Science and Technology Benefit Special Project17-3-3-62-nsh;Projects of Science and Technology of Ningbo 2016C11011]

在线出版日期：2018-01-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：86-93