低温诱导型凡纳滨对虾DEAD-box RNA解旋酶基因的克隆与表达分析

摘要：

为研究凡纳滨对虾耐寒性状的分子基础,克隆鉴定了凡纳滨对虾DEAD-box RNA解旋酶的同源基因.根据差减文库中筛选到的一个低温上调表达的DEAD-box RNA解旋酶基因片段,通过RACE PCR扩增获得两条高度相似的cDNA全长序列,两条cDNA均为1430 bp,包含139 bp 5'UTR、79 bp 3'UTR和1212 bp开放阅读框,编码403个氨基酸残基.Blast比对结果显示,两条cDNA与其他物种的DDX5相似性最高,推测为凡纳滨对虾DDX5基因的两个变异体,分别命名为LvDDX5variantA(LvDDX5A)和LvDDX5variant B (LvDDX5B),在系统进化树中,LvDDX5A和LvDDX5B聚为最近的一支,并与虾类DDX5、文昌鱼DDX、贝类的DDX5距离较近.Real-time PCR分析结果显示,LvDDX5A和LvDDX5B都呈多组织遍在表达,在精巢、鳃、肠、肌肉和卵巢中,LvDDX5B表达量高于LvDDX5A,而在肝胰腺中LvDDX5A表达量高于LvDDX5B.在低温胁迫对虾肝胰腺和心中,LvDDX5A呈上调表达而LvDDX5B表达量无明显变化.进一步对LvDDX5A在不同低温条件胁迫对虾的肝胰腺中表达变化进行了分析.结果显示,LvDDX5A在18℃、15℃、13℃和11℃低温胁迫36h均被诱导表达,并随着15℃和13℃低温胁迫时间的增加呈先上升后下降的表达模式,在48h达到峰值,LvDDX5A的低温诱导表达模式暗示其可能是在凡纳滨对虾低温适应中发挥作用的剪接体.

关键词：凡纳滨对虾、低温诱导、DEAD-box、RNA解旋酶、耐寒

所属期刊栏目：40

分类号：Q344+.1(遗传学分支学科)

资助基金：广西壮族自治区直属公益性科研院所基本科研业务费GXIF-2014-002;国家自然科学基金项目31460690;八桂学者建设专项资金BGXZ-NMBDX-05;现代农业产业技术体系建设专项编号:CARS-47资助[Supported by the Fundamental Research Funds for Nonprofit Research Institutes under Guangxi Zhuang Autonomous RegionGrant GXIF-2014-002;the National Natural Science Foundation of ChinaGrant 31460690;the Special Funds for Ba Gui Scholars Project ConstructionGrant BGXZ-NMBDX-05;the China Agriculture Research System Grant No.CARS-47]

在线出版日期：2016-11-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：474-480