日本鳗鲡肝脏表达抗菌肽2基因的克隆与表达

摘要：

为探讨鱼类抗菌肽基因的生物学功能,研究应用RACE方法克隆获得了日本鳗鲡(Anguilla japonica)肝脏表达抗菌肽2基因(Liver-Expressed Antimicrobial Peptide 2,LEAP-2),即AJLEAP-2的cDNA序列,全长为450bp,开放阅读框编码89个氨基酸.其成熟肽含有LEAP-2保守基序“C-X5-C-X4-C-X4-C”.AJLEAP-2基因组结构与其他脊椎动物LEAP-2相同,都包含有三个外显子.利用荧光定量PCR检测了AJLEAP-2在日本鳗鲡不同组织/器官中的表达,发现其转录子在肝脏中表达量最高,是内参基因(β-actin)的6倍;其次是肠道,但其表达量仅为肝脏的1/130.此外,还检测了AJLEAP-2在日本鳗鲡玻璃鳗(Glass eel)阶段的转录表达水平,结果显示,玻璃鳗中AJLEAP-2的转录表达量仅低于黑仔期的肝脏,为黑仔鳗肠道表达量的2倍.LPS和迟缓爱德华菌(Edwardsiella tarda)刺激能显著上调鳗鲡血液中AJLEAP-2的转录表达,刺激16h后上调倍数最高,分别为对照组的86倍和12倍.此外,LPS刺激72h和E.tarda刺激8h后,肠道中AJLEAP-2显著上调表达(P＜0.05),为对照组的8倍.Poly I:C刺激24h后,血液中AJLEAP-2转录表达显著下调.结果表明,AJLEAP-2在日本鳗鲡抗细菌感染过程中起重要的作用.

关键词：抗菌肽、LEAP-2、日本鳗鲡、迟缓爱德华氏菌

所属期刊栏目：40

分类号：Q344+.1(遗传学分支学科)

资助基金：国家自然科学基金31172438和U1205123;福建省自然科学基金2012J06008,201311180002和2014J05042;教育部留学回国人员科研启动金资助[Supported by the National Natural Science Foundation of China.31172438 and U1205123;the Natural Science Foundation of Fujian Province.2012J06008,201311180002 and 2014J05042;the Projects-sponsored by SRF,for ROCS,SEM]

在线出版日期：2016-11-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：252-260