赤眼鳟Mx基因全长cDNA克隆及其经GCRV攻毒后的组织表达分析

摘要：

为研究赤眼鳟(Squaliobarbus curriculus)Mx蛋白(Myxovirus resistance protein)的功能,采用简并PCR和SMART RACE方法从赤眼鳟脾脏中克隆得到Mx基因全长cDNA,并通过生物信息学方法分析其同源性,再利用实时荧光定量PCR (RT-qPCR)检测其在脾、肝、肠、肾等9个组织中的表达,以及感染草鱼呼肠孤病毒(Reovirus of Grass carp) GCRV-104后不同时间点赤眼鳟Mx的时空表达规律。结果表明：赤眼鳟Mx基因cDNA序列(ScMx)全长2325 bp,包含5′-UTR 40 bp,3′-UTR 371 bp和ORF 1884 bp,共编码627个氨基酸,其编码的Mx蛋白分子量约为70.9 kD,理论等电点 pI 为8.25,具有脊椎动物Mx蛋白共有的结构特征；赤眼鳟Mx与鲫鱼Mx3同源性最高； Mx在赤眼鳟脾、肝、肠、肾等9个组织中均有表达,其中肝脏中的相对表达量最高,脾脏次之,肠组织中的表达量最低；经GCRV-104病毒感染刺激后, ScMx在肝和脾组织中的表达量显著上调,均在48h到达峰值,分别为对照组的10倍(肝)和5倍(脾),且在这两个组织中的表达模式相似,均表现为先升高后下降的波动型变化趋势。研究表明ScMx参与了赤眼鳟抗GCRV-104病毒的免疫反应。

关键词：赤眼鳟、Mx基因、全长cDNA、组织表达

分类号：Q344+.1(遗传学分支学科)

资助基金：国家科技支撑计划2011AA011404;国家自然科学基金面上项目31272652

在线出版日期：2014-11-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：993-1001