一种快速构建集胞藻6803 petBD必需基因定点突变株的方法

摘要：

集胞藻6803(Synechocystis sp. Strain PCC 6803)是能够进行光合自养的原核生物，因其遗传背景清楚，特别是它具有天然的同源重组转化能力，是研究光合作用的模式生物之一[1-3]。以集胞藻进行分子生物学研究，最常用的方法是基因敲除，即基于同源重组原理，利用抗生素的抗性基因插入到目的基因内部，使其功能丧失[4]；如进行定点突变常规的方法是首先构建一个缺失质粒，通过同源重组缺失目的基因的部分片段；然后再构建一个回复突变质粒，在回复质粒内部设计突变位点，利用同源重组把缺失的基因片段(已经包含了突变的位点)再次重组进基因组，与此同时引入第二种抗生素基因，以第二种抗生素筛选转化子，经连续筛选，即可获得定点突变的转化子[5-7]。由于这种方法涉及基因的删除，所以如果要对必需基因进行定点突变，显然不能采用这种方法。

关键词：定点突变、pet BD必需基因、酶切位点、集胞藻6803

分类号：Q784;Q-33(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家“973”项目2011CBA00901

在线出版日期：2014-09-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：957-961