不同倍性泥鳅鳍细胞系的建立及生物学特性分析

摘要：

采用组织块培养法启动二倍体、三倍体和四倍体泥鳅鳍组织细胞原代培养,采用胰蛋白酶消化法传代,目前二倍体、三倍体和四倍体细胞已经分别传至59代、68代和68代。三种细胞均为成纤维细胞样细胞。鳍组织无菌处理方法是：先用质量浓度为10%的碘伏浸泡15min；后用青霉素和链霉素的混合液(500 IU/mL青霉素,500μg/mL链霉素)浸泡30min；原代培养和早期传代培养所用的培养基为DMEM/F12,添加体积分数为20%的胎牛血清、10 ng/mL人碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、20 ng/mLI型胰岛素样生长因子(IGF-I)以及10μg/mL硫酸软骨素。30代以后所用培养基为20% FBS-DMEM/F12。细胞培养在25℃、5% CO2培养箱中。在此条件下,二倍体、三倍体和四倍体的倍增时间分别为48.43h、36.01h和41.45h；二倍体、三倍体和四倍体的特征染色体数目分别为50条、75条和100条；测定的二倍体、三倍体和四倍体细胞及核的体积比分别为1︰1.37︰2.37和1︰1.53︰1.97；细胞经液氮冷冻保存60d 后,解冻复苏后测定存活率分别为(80.88±1.38)%、(84.48±1.13)%、(81.57±1.28)%。不同倍性的泥鳅细胞系的建立丰富了鱼类细胞系的种类,为揭示多倍体鱼类生长、遗传等机制打下基础。

关键词：泥鳅、细胞系、多倍体、生物学特性

分类号：Q178.1;S917.4(水生生物学)

资助基金：国家自然科学基金31272650

在线出版日期：2014-02-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：150-157