与不同病原菌相结合的凡纳滨对虾血蓝蛋白溶血活性对比分析
以凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)为研究对象,采用亲和孵育、PAGE、SDS-PAGE、Western-blotting、溶血活性测定等技术,探索与6种不同病原菌相结合的血蓝蛋白溶血活性的差异。结果发现,与副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)、溶藻酸弧菌(Vibrio alginolyticus)、河弧菌(Vibrio flurialis)、大肠杆菌(Escherichia coli K12)、乙型链球菌(Beta Streptococcus)和金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)6种不同细菌相结合的血蓝蛋白(分别命名为 HMC-VP、HMC-VA、HMC-VF、HMC-EC、HMC-BS、HMC-SA)对鸡红细胞表现出不同的溶血活性,其中HMC-VP、HMC-SA溶血活性最高(100.00%), HMC-VA溶血活性最低(39.68%)。在此基础之上,进一步采用糖基氧化和胰蛋白酶消化等策略探索引起该6种血蓝蛋白溶血活性差异的分子基础。结果表明,该6种血蓝蛋白经糖基氧化后,溶血活性大幅度下降抑或丧失,而经胰蛋白酶水解后,溶血活性大幅度升高抑或达到100.00%。由此说明,与不同病原菌相结合的血蓝蛋白免疫学功能(溶血活性)存在显著性差异,造成该差异的原因可能与血蓝蛋白的糖基化修饰、蛋白构象的多样性有关。
对虾、血蓝蛋白、溶血活性、多样性
S945.4(水产保护学)
国家自然科学基金.30871939&31072237;教育部新世纪优秀人才支持计划项目NCET-11-0922;广东省自然科学基金.10251503101000002&9151064001000001;广东省科技计划项目2009B020309006;广东省高等学校高层次人才项目2011
2013-12-04(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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