褶纹冠蚌过氧化物还原酶6基因的克隆及原核表达

摘要：

过氧化物还原酶6具有谷胱甘肽过氧化物酶和磷脂酶A2的双重活性,在机体抗氧化保护及肺表面活性物质代谢中具有重要的作用.研究克隆和分析了褶纹冠蚌Prx6 (CpPrx6) 基因的cDNA序列特征.结果表明CpPrx6基因的cDNA全长1617 bp; 其中5′端非翻译区为71 bp,3′端非翻译区为889 bp,开放阅读框为657 bp,可以编码218个氨基酸.CpPrx6氨基酸序列与其他已知贝类Prx6的同源性为70%-72%.CpPrx6蛋白含有1-Cys 型Prx共有的保守催化中心"PVCTTE"和脂肪酶基序"GKSWA",三级结构中包含6个α螺旋、12个β折叠,催化中心位于第5个α螺旋内.CpPrx6基因在褶纹冠蚌血细胞、外套膜、闭壳肌、肝胰腺、鳃等组织中均有表达,其中鳃的表达量最大.嗜水气单胞菌刺激后6h和12h时CpPrx6在肝胰腺中的表达量明显增加 (6h,P<0.05; 12h,P<0.01),在血细胞和鳃组织中12h的表达量增加,24h时恢复到正常水平.将CpPrx6基因亚克隆到pET-32a(+) 质粒中构建了重组质粒,SDS-PAGE分析发现重组质粒在大肠杆菌DE3中获得了表达.

关键词：褶纹冠蚌、过氧化物还原酶6、组织表达、原核表达

所属期刊栏目：36

分类号：Q781(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家自然基金30960296,31060359;江西省教育厅项目GJJ10378,GJJ12024;江西省科技攻关项目2004;江西省自然科学基金GZN1923

在线出版日期：2013-01-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：1048-1055