罗非鱼无乳链球菌Sip基因的克隆、表达及免疫原性分析

摘要：

表面免疫原性蛋白(Surface Immunogenic Protein,Sip)是B群链球菌(Group BStreptococcus,GBS)的一种表面蛋白,在GBS多种血清型的菌株中均有表达.研究从实验室分离到的罗非鱼无乳链球菌广东株的基因组DNA中扩增出Sip基因,构建原核表达载体pColdII-Sip,转化大肠杆菌(Escherichia coli)BL21 (DE3)菌株.经诱导表达、SDS-PAGE电泳检测显示重组蛋白主要以可溶形式表达.重组蛋白用亲和层析的方法纯化,蛋白纯度达98％.纯化后的重组蛋白免疫罗非鱼(Oreochromis niloticus,GIFT strain)以分析其免疫原性.受免鱼免疫14d后进行人工攻毒试验,免疫组的相对保护率为70％-87％.酶联免疫吸附试验(Elisa)显示受免鱼对重组蛋白产生了较好的免疫应答,免疫剂量为3 tg/g和5 μg/g时受免鱼血清抗体滴度可达1:128000.研究结果显示重组蛋白Sip具有较强的免疫原性和保护作用,Sip基因可作为罗非鱼链球菌基因工程亚单位疫苗候选基因.

关键词：罗非鱼、无乳链球菌、表面免疫原性蛋白、原核表达、免疫原性、抗体、相对保护率

所属期刊栏目：36

分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家高技术研究发展计划863计划2011AA100404;现代农业产业技术体系专项资金资助CARS-49;广东省海洋渔业科技推广专项A201101C02

在线出版日期：2012-12-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：626-633